Gambrinus zu Borbetomagus
Posting Freak Beiträge: 3085 Registriert: 2.6.2012 Status: OfflineGeschlecht:
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erstellt am: 23.7.2014 um 14:50 |
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Hallo Braufreunde, ic habe heute Methylenblau bekommen als Pulver. Nun muss
ich ja für den lebend tot nachweis bei Hefezellen eine Lösung herstellen.
Weiß nicht welche und wie genau das geht. Alkohol habe ich nicht da nur
Isopropanol 99 % geht das auch ??
____________________ Zertifiziertes Mitglied der "Worschtmarktbrauerbubenbieratenbartei" WBBBB
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Senior Member Beiträge: 196 Registriert: 15.11.2010 Status: Offline
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:03 |
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Antwort 1 |
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Gambrinus zu Borbetomagus
Posting Freak Beiträge: 3085 Registriert: 2.6.2012 Status: OfflineGeschlecht:
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:05 |
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Das ist für Blut... Nach Löffler? Ist das richtig ?
____________________ Zertifiziertes Mitglied der "Worschtmarktbrauerbubenbieratenbartei" WBBBB
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Antwort 2 |
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Senior Member Beiträge: 196 Registriert: 15.11.2010 Status: Offline
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:07 |
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steht da, Verwendung: Färbung von Bakterien und Protozoen
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Antwort 3 |
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Gambrinus zu Borbetomagus
Posting Freak Beiträge: 3085 Registriert: 2.6.2012 Status: OfflineGeschlecht:
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:14 |
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Man dieses Kaliumhydroxid-Lösung 1% habe ich nicht und wird wohl auch
schwer zu besorgen sein
____________________ Zertifiziertes Mitglied der "Worschtmarktbrauerbubenbieratenbartei" WBBBB
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Antwort 4 |
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Senior Member Beiträge: 311 Registriert: 23.3.2011 Status: OfflineGeschlecht:
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:15 |
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Ja, Löffler ist richtig.
So ist die Stammlösung herzustellen:
( Quelle)
Löfflers Methylenblau : 2g Methylenblau werden in 100ml 70%igem Ethanol
gelöst.Diese Stammlösung ist unbegrenzt haltbar.
30ml dieser haltbaren, unfiltrierten Stammlösung werden mit 100ml Aqua
dest. verdünnt und mit 1ml 1%iger Kalilauge (KOH) versetzt.
Die Gebrauchslösung ist lange haltbar, muß aber hin und wieder filtriert
werden. Sehr alte Lösungen ergeben Färbungen in einem stark rotstichigen
Blau.
Und so ist die Färbung durchzuführen:
( Quelle) Seite 54
3.2.3.3 Kernfärbung mit Methylenblau (Vitalfärbung von Hefezellen)
Zur Ermittlung des Anteils an lebenden Zellen wurden Hefen in Flüssigkultur
mit einer 0,1 %-igen Methylenblaulösung nach Löffler (Merck 13, 6085) für
10 min bei RT inkubiert und anschließend ca. 3 μl Zellsuspension
zwischen eine Neubauer-Kammer gegeben und mittels eines
Durchlichtmikroskops ausgezählt.
Edit: Wegen Kaliumhydroxid kannst du vielleicht mal freundlich in der
Apotheke fragen. 1% sollte keinerlei Probleme machen...
Edit2: oder hier oder hier... also da
fände sich sicher ein Weg...
[Editiert am 23.7.2014 um 15:24 von Phalanx]
____________________ #+- This line is intentionally left blank
#+-
flickr
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Antwort 5 |
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Administrator Beiträge: 10493 Registriert: 23.10.2005 Status: OnlineGeschlecht:
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erstellt am: 23.7.2014 um 15:38 |
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...bevor das jetzt hier wieder zu länglich wird, vielleicht hilft das oder das. Ich glaub, da ist alles erklärt.
Gruß
Michael ____________________ „Lass die anderen mit Fichten- und Tannensprossen würzen, der Hopfen ist
das Beste, was die Natur uns bietet.“
Aus "Das Erbe des Bierzauberers" von Günther Thömmes, Gmeiner Verlag
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Posting Freak Beiträge: 2085 Registriert: 26.2.2013 Status: Offline
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erstellt am: 23.7.2014 um 18:51 |
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Moin,
Zur Anleitung von Phalanx möchte ich noch was ergänzen:
Du kannst beim Runterverdünnen auf die Gebrauchslösung auch einfach anstatt
Kalumhydroxid einen Tropfen Natriumhydroxid (NaOH, Ätznatron) zugeben,
genaue Menge und Art der Lauge ist eigentlich ziemlich egal so lange es
basisch bleibt.
Grüße ____________________ *Dunkles Lager, Magnum/Select/Tettnanger, S189 (Hauptgärung)
*Festbier, Northern Brewer/Tettnanger/Saazer/Select, S-189 (Nachgärung)
*Helles Lager, Tettnanger/Select/Saazer, S-189 (Nachgärung)
*Westy12 Clone, 21.6°P, W3787 (Lagerkeller)
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Antwort 7 |
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